2009年11月26日 星期四

1. 請舉兩種實驗室常用Knock –down 基因的方法。

RNAiRNA interferenceRNA干擾)的簡稱,其作用具序列專一性,是一種可造成RNA降解(RNA degradation)進而導致該RNA分子失去功能的一種作用,此作用係透過小片段之RNA分子(約20~25 核苷酸,稱為small interfering RNA,簡稱siRNA)結合到與其序列互補之RNA上,形成雙股RNA,引發連串雙股RNA分解與合成放大作用,造成該特定基因失去功能,3端有2個核酸的突出RNAi亦可稱為轉錄後基因靜默作用(post transcriptional gene silencing, PTGS),係因RNAi作用於基因轉錄為mRNA後,透過降解作用,使得mRNA無法轉譯成蛋白質,而產生該基因靜默現象。細胞中的siRNA可以由外力將化學合成的siRNA直接送入細胞或是由DNA載體表現系統在細胞中表現。此現象目前已廣泛應用於功能性基因體學(Functional Genomics)之研究,利用小片段的siRNA先將特定基因的RNA加以破壞,再由其破壞後所造成的結果,去推估該特定基因的功能力,例如已被應用於參與細胞生長、分化以及死亡等關鍵基因的鑑別,同時siRNA也被應用於保護細胞免於病毒感染、抑制腫瘤形成以及其他相關致病分子機制的研究。

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